由酶联免疫吸附实验法可知,酶标仪应该用比色法来分析抗原或抗体的含量,即它应依照比色原理进行工作。实际上,酶标仪就是一台变相的光电比色计或分光光度计,其基本工作原理与主要结构和光电比色计几乎相同。
酶标检测仪工作原理
光源灯发出的光线经过滤光片或单色器后,成为一束单色光束。该单色光束经过塑料微孔板中的待测标本,被标本吸收掉一部分后,到达光电检测器。光电检测器将投射到其上面的光信号的强弱变成电信号的大小。此电信号经前置放大、对数放大、模数转换等模拟信号处理后,送入微处理器进行数据处理和计算。最后由显示器和打印机将测试结果显示、打印出来。
微处理机还通过控制电路来控制X、Y方向的机械驱动机构的运动。但对于非自动型的酶标仪,它是用手工来移动微孔板的,可以省去X、Y方向的机械驱动机构及其电路,这样的仪器体积更小,结构也更简单。
微孔板是一种用来盛装待测样本的透明塑料板,板上有多排小孔,如有40孔板、55孔板和96孔板等多种规格。每个小孔可以盛放零点几毫升的溶液。根据仪器的不同,既可以一个孔一个孔地检测,也可以一排孔一排孔地检测。
酶标仪既可以使用和分光光度计相同的单色器,也可以使用干涉滤光片来获得单色光。和光电比色计一样,使用滤光片作过滤装置时,将滤光片设计到微孔板的前面和后面效果是一样的。
一种酶标仪的光路系统。光源灯发出的光,经过聚光镜、光阑后,到达反射镜,经反射镜作90o反射后,垂直通过比色液,然后再经滤光片到达光电管。
一种酶标仪光路系统
一般酶标仪的光束既可以设计成从上到下通过比色液,也可以设计成从下到上通过比色。
由酶标仪的工作原理方框图和光路图可以看出,它和普通光电比色计的不同之处在于:一是盛装比色液的容器不是使用比色皿,而是使用了塑料微孔板,塑料微孔板常用透明的聚乙烯材料制作,之所以采用塑料微孔板来作固相载体,是利用它对抗原或抗体有较强的吸附这一特点;二是酶标仪的光束是垂直通过待测液的;三是酶标仪通常不使用A而是使用光密度OD来表示吸光度。
酶标仪有单通道和多通道两种类型,单通道又分为自动型和手动型两种。其中,自动型的仪器设有X和Y两个方向的驱动机构,在机械装置的驱动下,微孔板上的小孔一个个依次进入光束下面测试。手动型靠手移动微孔板来进行测量。
在单通道酶标仪的基础上,又发展了多通道、全自动型酶标仪。多通道酶标仪一般都是自动型的,它设有多个光束和多个光电检测器。如8通道的仪器,设有8条光束(或8个光源)、8个检测器和8个放大器。在机械驱动装置的作用下,样品被8个一排、8个一排检测。多通道酶标仪的检测速度快,但其结构比较复杂,价格也较贵,多用于大中型医院。